分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。元析分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。
常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
分光光度計屬于精密儀器,應當妥善保管和精心維護,這樣才能保證分光光度計長期使用、長期的穩定可靠、測量精度高。
分光光度計的環境要求:
1、環境溫度在條件容許的情況下,盡量保持在15-30攝氏度之間,這樣能保持電器件穩定工作,不易老化,使分光光度計不易損壞,燈源的使用壽命得到延長。若條件不容許,在高溫的情況下,縮短開機時間,使用分光光度計,使電器件不要長期保持在高溫下。在低溫下,使預熱時間比常溫下的預熱時間要長,這樣能保證在儀器穩定的情況下進行測試。
2、環境濕度在條件容許的情況下,盡量保持在60%以下,這樣能保證光度計內部的光學件和電器件不易受潮、腐蝕、和上霉。若條件不容許,在高濕度和低濕度的情況盡量保持通風。
3、環境在條件容許的情況下盡量保持潔凈,打掃環境時動作不宜太大,不要揚起灰塵,打掃之前用防塵罩蓋上分光光度計,不要讓灰塵進入分光光度計內部。
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